В течение 8 рабочих дней после поступления образцов результаты придут на почту или в Telegram-бот
3
Подготовьте и передайте образцы
Можно привезти лично или оформить доставку
2
Дождитесь подтверждения заявки
Мы свяжемся, чтобы уточнить детали и согласовать оплату
1
Заполните заявку
На сайте или через Telegram‑бот
4 простых шага, чтобы заказать секвенирование
Рассчитать стоимость секвенирования
1 образец+1 праймер=1 сиквенс реакции
Подготовка образцов и праймеров
Правильная подготовка образцов и праймеров — ключ к качественным и воспроизводимым результатам. Чтобы упростить этот этап, мы подготовили удобные чеклисты с подсказками по концентрации, объёму и методам очистки.
Для получения наилучших результатов необходимо отдельно отправить образцы и праймеры в достаточных концентрациях и объеме, а также выбрать наиболее подходящий способ очистки, если необходимо. Лучше всего отправлять образцы и праймеры в стрипах или планшетах, но мы можем принять образцы и праймеры в любых подписанных пробирках. Один сиквенс = один образец + один праймер
Какой у вас образец?
1) Плазмида
a) Какая длина вашей плазмиды?
i) Менее 5 тысяч оснований
Минимальный объем образца 10 мкл в концентрации от 50 нг/мкл (этого хватит на два сиквенса и измерение концентрации), добавьте по 4 мкл на каждый дополнительный сиквенс
ii) Более 5 тысяч оснований
Минимальный объем образца 10 мкл в концентрации от 100 нг/мкл (этого хватит на два сиквенса и измерение концентрации), добавьте по 4 мкл на каждый дополнительный сиквенс
2) Амликон
Образцы необходимо отправить в течение недели после ПЦР !
a) Вы очистили ампликон?
i) Да
Минимальный объем 10 мкл в концентрации от 20 нг/мкл (этого хватит на два сиквенса и измерение концентрации), добавьте по 4 мкл на каждый дополнительный праймер. В комментарии к заявке стоит указать метод очистки и буфер для элюции
ii) Не чистили и возможно несколько продуктов?
Лучше всего подойдет очистка через электрофорез. Для этого необходимо от 20 мкл ПЦР смеси с вашим ампликоном
iii) Не чистили, ампликон один?
Вам подойдут ферментативная очистка или очистка на магнитных частицах, первая лучше для фрагментов 150−700 оснований, вторая — для более длинных фрагментов. Потребуется от 10 мкл ПЦР-смеси (этого хватит на два сиквенса и измерение концентрации) и добавьте по 4 мкл на каждый дополнительный сиквенс
Правильно подобранные праймеры составляют важную часть процесса секвенирования. Учтите особенность метода — читаемая последовательность начинается не ранее, чем через 30 букв после праймера
Температура отжига в диапазоне от 58 до 65°С
Оптимальная длина— 20 нуклеотидов
Праймеры не должны быть вырожденными или флуоресцентно меченными
Праймер не должен образовывать гомодимер со «свисающим» 5’ концом
Можете указать в заявке последовательности праймеров – мы проверим за вас
Праймеры необходимо передавать отдельно от образцов
Концентрация для отправки к нам – 5 мкМ (5пмол/мкл)
Объем от 10 мкл для пары сиквенсов, далее из расчета по 4 мкл на каждый дополнительный сиквенс (образец)
У нас есть коллекция праймеров, их использование входит в стоимость, просто выберите их из выпадающего списка в заявке